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Invitrogen反转录酶III的生理功能包括三种活性

发布时间: 2020-07-21  点击次数: 824次
   Invitrogen反转录酶III是从克隆有莫洛尼氏鼠白血病病毒反转录酶基因的大肠杆菌中表达并经过柱纯化分离出来的重组蛋白,是由一个71kDa的单亚基组成的反转录聚合酶。本酶经修饰,RNaseH的活性比普通的要弱很多,因此在合成cDNA链的过程中,RNA模板的降解降低,从而使得率提高。
 
  Invitrogen反转录酶III的生理功能:
  反转录过程由反转录酶催化,该酶也称依赖RNA的DNA聚合酶,即以RNA为模板催化DNA链的合成。合成的DNA链称为与RNA互补NA(cDNA)。
 
  反转录酶都具有多种酶活性,主要包括以下三种活性。
  (1)DNA聚合酶活性
  以RNA为模板,催化dNTP聚合成DNA的过程。此酶需要RNA为引物,多为赖氨酸的tRNA,在引物tRNA3-末端以5→3方向合成DNA。
 
  (2)RNaseH活性(RNA酶)
  由反转录酶催化合成的cDNA与模板RNA形成的杂交分子,将由RNaseH从RNA5端水解掉RNA分子。
 
  (3)DNA引导的DNA聚合酶活性
  以反转录合成的一条DNA单链为模板,以dNTP为底物,再合成第二条DNA分子。
 
  除此之外,有些反转录酶还有DNA内切酶活性,这可能与病毒基因整合到宿主细胞染色体DNA中有关。
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